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安捷倫XDB-C8液相色譜柱

更新時(shí)間:2015-11-30      點(diǎn)擊次數(shù):1700

安捷倫XDB-C8液相色譜柱

 

Agilent ZORBAX Eclipse XDB 色譜柱(C18、C8、苯基和氰基)提供四種鍵合固定相,用于方法開(kāi)發(fā)優(yōu)化。這些色譜柱可在寬pH 范圍(pH 2-9) 內(nèi)提供良好的峰形,用一系列色譜柱可進(jìn)行靈活的其他方法開(kāi)發(fā)。Eclipse XDB 色譜柱可以在低pH (2-3) 條件下用于方法開(kāi)發(fā),且同樣的色譜柱還可以在中等pH (6-8) 范圍內(nèi)用于方法開(kāi)發(fā)。在中等pH 范圍內(nèi),殘留硅醇基活性更大,且更容易發(fā)生相互作用,造成峰拖尾。為了克服這些相互作用,Eclipse XDB 色譜柱通過(guò)工藝進(jìn)行超密鍵合和雙封端,以覆蓋盡可能多的活性硅醇基。zui終堿性化合物在pH 2-9 范圍內(nèi)具有出色的峰形??商峁┝綖?.8、3.5、5 和7um 的Eclipse XDB 色譜柱,實(shí)現(xiàn)高速、高分離度、分析和制備放大分離。

 

 

 

 

ZORBAX Eclipse XDB-C8

ZORBAX Eclipse Plus C8 柱有幾種填料粒徑和柱尺寸,是提率的良好工具。它們分離酸性、中性和堿性化合物都有良好的峰形。是方法開(kāi)發(fā)的色譜柱。

Eclipse Plus C8 的選擇性

色譜柱的選擇要考慮到一些因素。選擇性是進(jìn)行色譜柱選擇zui重要的因素之一。選擇性系數(shù)(α)是兩個(gè)峰的

相對(duì)保留值:α = k2 / k1在這里k2 和k1 分別是第二個(gè)洗脫出來(lái)的峰和*峰的保留因子,也稱(chēng)容量因子。如果這兩個(gè)峰一起被洗脫,α 為1 ;對(duì)這兩個(gè)緊密相鄰的峰來(lái)說(shuō),選擇性接近1。選擇性,或峰間距,可以通過(guò)改變溫度、流動(dòng)相或固定相(色譜柱)進(jìn)行調(diào)節(jié)。因?yàn)檫x擇性體現(xiàn)了分析物與固定相/流動(dòng)相之間的相互作用,所以難以理解、也很難預(yù)測(cè),常常需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化。有各種柱子可供選擇,這是改變α的有力而容易的辦法,尤其是因穩(wěn)定性、溶解度、pH 或其它局限無(wú)法改變流動(dòng)相時(shí)。圖1 顯示了在同樣的色譜條件下,Eclipse

Plus C8 柱、Eclipse Plus C18 柱,和Eclipse XDBC8 柱的不同選擇性。Eclipse Plus C8 柱與EclipseXDB-C8 柱相比,雖然對(duì)三種非常難分離的化合物來(lái)說(shuō),α僅改變了6%,但分離度增加了1 倍,從1.23 增至2.42。

這些柱子都有相似之處,如,同樣以ZORBAX硅膠為基質(zhì),都采用的是安捷倫控制的生產(chǎn)技術(shù),因此,可以預(yù)

計(jì)其洗脫順序也比較相似,如圖所示。但它們之間也有明顯的不同,例如,Eclipse Plus 柱和Eclipse XDB 柱采用的的硅膠處理和鍵合技術(shù)不同,C18 和C8的官能團(tuán)也不同。這些差異反映為選擇性的不同,進(jìn)而將改善分離度。對(duì)于a接近1 的緊密相鄰峰,a的微小變化將對(duì)分離度產(chǎn)生極大的影響,例如在這個(gè)例子中,a 從1.07變?yōu)?.14,分離度就從1.15 增加到2.42。

 

堿性化合物的出色峰形

Eclipse Plus 柱(C8 和C18)的zui顯著的特點(diǎn)是分離各種類(lèi)型樣品:酸性、堿性和中性樣品,都能得到出色的峰形。在上述例子的各圖中都列出了用美國(guó)藥典拖尾因子計(jì)算表示的峰形。每個(gè)例子中,都接近于理想狀態(tài)(1.0)。高性能+峰形,柱效和分離度+均歸功于全程嚴(yán)格控制的、改進(jìn)的硅膠生產(chǎn)和鍵合技術(shù)。堿性化合物(特別是含氨基的分子)的反相色譜分離經(jīng)常很困難。在低pH條件下(pH < 3),堿發(fā)生質(zhì)子化(BH+),因而水溶性很強(qiáng),保留較差。在pH 7時(shí),某些氨基可能仍然質(zhì)子化,而其它的則失去其質(zhì)子(B)。硅膠上沒(méi)有反應(yīng)*的硅醇基呈離子型(SiO-),將與質(zhì)子化的離子樣品發(fā)生相互作用。這種離子交換二級(jí)反應(yīng)將導(dǎo)致峰拖尾。在低pH 條件下,硅醇基未離子化(SiOH),與堿性分析物不發(fā)生相互作用。Eclipse Plus進(jìn)行了*的ZORBAX硅膠處理、封端和鍵合,降低了離子化硅醇基的相互作用,顯著改善了峰形。

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