液相色譜儀測(cè)定飼料中添加劑維生素A的檢測(cè)方案,維生素A是復(fù)雜機(jī)體必需的一種營(yíng)養(yǎng)素,維持正常的視覺(jué)反應(yīng)。維持上皮組織的正常形態(tài)與功。維持正常的骨骼發(fā)育。它以不同方式幾乎影響機(jī)體的一切組織細(xì)胞。盡管是一種zui早發(fā)現(xiàn)的維生素,但有關(guān)它的生理功能至今尚末*揭開(kāi)。就目前的知識(shí)而言,維生素A(包括胡蘿卜素)zui主要是生理功能包括:①.維持視覺(jué)②.促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育③.維持上皮結(jié)構(gòu)的完整與健全④.加強(qiáng)免疫能力⑤.清除自由基。
1.試劑和溶液
1.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
?。?)維生素A乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)品:維生素A乙酸酯含量≥99.0%
?。?)維生素A乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)貯備液:稱取維生素A乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)品34.4mg(至0.00001g)于棕色容量瓶中,用甲醇溶解并稀釋至刻度,混勻,4℃保存,該貯備液濃度為344ug/ml(1000IU/ml)。
?。?)維生素A乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)工作液:準(zhǔn)確吸取維生素A乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)貯備液1.0ml于100ml棕色容量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,混勻,配置工作液濃度為3.44ug/ml(10IU/ml)。
1.2試樣溶液制備
稱取試樣1g,至0.0001g,置于100ml的棕色容量瓶中,加入約80ml的甲醇,瓶塞不要擰緊,于60℃超聲波水浴中超聲提取30min,冷卻至室溫,用甲醇稀釋至刻度,充分搖勻。如果試樣中維生素A乙酸酯的標(biāo)示量低于107IU/kg,則將溶液用0.45um的濾膜過(guò)濾,進(jìn)樣測(cè)定,否則需將溶液用甲醇進(jìn)一步稀釋,使維生素A乙酸酯的進(jìn)樣濃度與維生素A乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)工作液接近。
2.色譜條件
(1)色譜柱:VERTEXC18柱4.6*150mm*5um
?。?)流動(dòng)相:甲醇:水=98:2
(3)流速:1.2ml/min
?。?)檢測(cè)波長(zhǎng):326nm
(5)進(jìn)樣量:20ul
?。?)溫度:室溫
3.儀器
水浴超聲波,液相色譜儀LC-10Tvp,紫外檢測(cè)器SPD-10Tvp
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