反相色譜柱采用全覆蓋的鍵合硅膠填料,因此具有優(yōu)異的穩(wěn)定性,均勻的涂層確保了固定相具有高選擇性和率的分離特點(diǎn)。
下面分享兩點(diǎn)如何選擇反相色譜柱的方法:
1.反相色譜柱的柱子的PH值使用范圍
反相色譜柱優(yōu)點(diǎn)是固定相穩(wěn)定,應(yīng)用廣泛,可使用溶劑。但硅膠為基質(zhì)的填料,使用時(shí)一定要注意流動(dòng)相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8,流動(dòng)相的PH值小于2時(shí),會(huì)導(dǎo)致鍵合相的水解;當(dāng)PH值于7時(shí)硅膠易溶解;經(jīng)常使用緩沖液固定相要降解。一旦發(fā)生上述情況,色譜柱人口處會(huì)塌陷。同樣填料各種不同牌號(hào)的色譜柱不盡相同。如果流動(dòng)相PH較高或經(jīng)常使用緩沖液時(shí),建議選擇PH范圍大的柱子,例如戴安公司的Acclaim柱PH2-9或Zorbax的PH2-11.5的柱子。
2.反相色譜柱填料的端基封尾(或稱封口)
把填料的殘余硅羥基采用封口技術(shù)進(jìn)行端基封尾,可改善對(duì)極性化合物的吸附或拖尾;含碳量增高了,有利于不易保留化合物的分離;填料穩(wěn)定性好了,組分的保留時(shí)間重現(xiàn)性就好。如果待分析的樣品屬酸性或堿性的化合物,選用填料經(jīng)端基封尾的色譜柱。