液相色譜主要用于對吸收紫外線的液態(tài)有機物(不飽和有機物)進行定性、定量分析和純度分析,定性,是保留時間的特征峰值。沒有辦法分析物質結構,但如果已知的物質是x,則要測量的物質可以與x標準物質比較。液相色譜測定表明,該物質的停留時間相同,測定結果表明,該物質主要用于測試中的色譜鑒定。
液相色譜儀定量,即濃度與峰值面積成正比。要測量的材料的純度是根據(jù)標準產(chǎn)品的標準曲線計算的。主要用于內容的確定。純度分析,這是以波長為基礎的。物質的純度大致由樣品在特定波長注入時主成分色譜和雜質色譜的峰值面積決定,主要用于測定相關物質。
高效液相色譜進樣的濃度沒有確切的濃度因為濃度是由許多因素決定的不是的。
液相色譜的濃度與以下因素有關:
1.探測器探測能力。紫外、蒸發(fā)、差示和熒光探測器的探測能力不同。其中,紫外探測器的靈敏度、光源能量、循環(huán)電池的通透性和清潔度都決定了紫外探測器的檢測能力。液相色譜儀
2.物質響應值。同一檢測器下檢測到的不同物質的信號大小不同。同一濃度為1mg/ml,a、b物質的響應值可相差2倍、10倍甚至100倍。
3.液相色譜HPLC中紫外檢測波長同一物質在不同紫外波長下的響應值不同這與該物質在該波長下的吸收值有關.
4.高效色譜柱的載量,有時物質濃度過高超過色譜柱的負荷范圍,會形成“平頭峰”或峰分叉,肩峰,對稱性差等分離問題。
5.液相色譜儀按方法驗證事實上,應用于常規(guī)測試方法的zui高濃度應通過一系列方法學驗證來驗證,以證明濃度的合理性和可行性方法學驗證中zui高濃度主要需要通過線性試驗、回收率試驗、重復性試驗、專屬性試驗和系統(tǒng)適用性試驗。