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液相色譜在藥物分析的應(yīng)用

更新時(shí)間:2019-12-02      點(diǎn)擊次數(shù):2627

液相色譜不受分析對(duì)象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機(jī)化合物中,可用氣相色譜分析的約占20%,而80%則需用液相色譜來(lái)分析。液相色譜已經(jīng)廣泛應(yīng)用于藥物的含量測(cè)定、組成分析、質(zhì)量控制等方面。近年來(lái) 液相色譜在藥物分析的應(yīng)用 中占主要地位。

 

液相色譜在天然藥物及復(fù)方成藥分析中的應(yīng)用

 

ELSD能夠測(cè)定沒(méi)有紫外吸收或?yàn)樽贤饽┒巳跷盏臉悠?,天然產(chǎn)物中的許多成分無(wú)疑找到了直接、準(zhǔn)確的測(cè)定方法。ELSD在天然產(chǎn)物及其復(fù)方成藥分析中的應(yīng)用報(bào)道主要有皂苷類(lèi)、生物堿類(lèi)、萜類(lèi)內(nèi)酯等。皂苷無(wú)紫外吸收或僅為末端吸收,ELSD能夠?qū)ζ洳唤?jīng)衍生進(jìn)行檢測(cè),在HPLC—ELSD的應(yīng)用中這方面的報(bào)道zui多。主要有一次性分離分析天然人參、生脈散復(fù)方、育精膠囊中的多種人參皂苷;西洋參中的人參皂苷和擬人參皂苷定量測(cè)定;三七中的三七皂苷的含量分析;黃芪、黃芪注射液和保元湯中的黃芪皂苷、黃芪甲甙的分離和測(cè)定;麥冬中的甾體皂甙元;天麻中的天麻甙的含量測(cè)定等。這些研究主要采用Cl8柱、乙晴與水作流動(dòng)相,不經(jīng)衍生直接測(cè)定多組分含量,結(jié)果顯示方法靈敏度高(一般檢測(cè)限低于3μg/m1)、線(xiàn)性關(guān)系良好。對(duì)于無(wú)紫外吸收的生物堿類(lèi)成分,ELSD同樣顯示出操作簡(jiǎn)單、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。對(duì)比HPLC—UV法測(cè)定貝母中的甾類(lèi)貝母生物堿,采用ELSD檢測(cè)器,不但不需衍生化操作,提高了結(jié)果的準(zhǔn)確度,而且可檢測(cè)出不含雙鍵的貝母甲素,對(duì)動(dòng)物體內(nèi)的生物堿類(lèi)成分如河豚du素,無(wú)紫外吸收且安全性低,不適合衍生化法,可用ELSD法進(jìn)行檢測(cè),獲得滿(mǎn)意結(jié)果。銀杏作為一種保健藥品,其主要活性成分為黃酮類(lèi)和萜類(lèi)內(nèi)酯,以往銀杏中的萜類(lèi)內(nèi)酯成分主要采用HPLC—UV法和HPLC—RI測(cè)定,但由于萜類(lèi)內(nèi)酯紫外吸收差,又含少量物質(zhì)的干擾,結(jié)果穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性較差。隨著ELSD的發(fā)展和普及,這些方法已經(jīng)逐漸被ELSD法所取代。

 

液相色譜在抗生素分析中的應(yīng)用

 

生產(chǎn)抗生素時(shí),首先要了解發(fā)酵液中的主體與付產(chǎn)物的存在情況。例如:青霉素、四環(huán)素、頭孢子菌素、紅霉素、柔紅霉素、慶大霉素等的發(fā)酵產(chǎn)物,均可用C18柱和甲醇及緩沖液配制的流動(dòng)相或用離子對(duì)法,分析主體及其收產(chǎn)物的含量。對(duì)普魯卡因酰胺、茶堿等可進(jìn)行主體含量的測(cè)定,對(duì)xiao酸甘油可測(cè)定主體含量及其降解產(chǎn)物,以便保證藥物的熱量。

 

液相色譜作為常規(guī)分析方法在藥物分析中的應(yīng)用

 

液相色譜法作為藥物分析中的zui主要的分析方法,常被作為常規(guī)分析和檢驗(yàn)方法。近年來(lái)在這個(gè)方面的研究比較多,劉樹(shù)業(yè)等為時(shí)刻監(jiān)控治療肝癌時(shí)的抗癌藥物劑量即血中的藥物濃度,提高療效,減少副作用,采用紫外-HPLC法對(duì)血中和組織中的阿霉素濃度進(jìn)行分析。用UV-240紫外分光光度計(jì),BECKMAN332型液相色譜儀,采用反向色譜法。針對(duì)近幾年奧委會(huì)醫(yī)學(xué)委員會(huì)公布的禁用表中新增藥物及一系列利尿劑的相關(guān)化合物進(jìn)行了研究,比較了不同的提取方法及回收率,研究了幾種藥物的排泄情況;建立了同時(shí)分析13種利尿劑的液相色譜測(cè)定方法,檢出限小于5ng。用0.02mol/L的三羥甲基胺基甲烷(用磷酸調(diào)pH值至7)和甲醇(含2%乙酸和0.25%庚烷磺酸鈉)作流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,建立了脂性油膏藥物中黃芩甙含量的反相液相色譜分析方法,本法分析速度快,重現(xiàn)性好,黃芩甙的平均回收率為103.7%。

 

液相色譜在藥物殘留測(cè)定上的應(yīng)用

 

由于液相色譜能夠?qū)繌?fù)雜組分進(jìn)行定量分析,被廣泛使用于藥物殘留的測(cè)定上。以液相色譜法建立了豬、羊、雞肝組織中西wei因殘留量的檢測(cè)方法。采用ODS色譜柱,二極管陣列檢測(cè)器,甲醇/水(65/35)為流動(dòng)相,222nm檢測(cè)波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)。西wei因?qū)φ掌啡芤旱膠ui低檢測(cè)限為0.1mg/L,線(xiàn)性范圍為0.1~20mg/L,標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)回歸方程為:y=-22459.83+454684.31x,線(xiàn)性關(guān)系良好(r=0.9999)。樣品以乙腈提取,并加入無(wú)水硫酸鈉和正已烷,過(guò)濾后去除雜質(zhì),乙腈層在45~50℃下水浴氮?dú)獯蹈桑瑲堅(jiān)眉状既芙夂?,進(jìn)樣分析。平均回收率均大于80%,日間和日內(nèi)變異系數(shù)均小于10%。符合藥物殘留痕量分析要求。研究了動(dòng)物源性食品中甲氧芐胺嘧啶藥物殘留的提取、凈化和液相色譜分析條件,建立了液相色譜法測(cè)定動(dòng)物性食品中甲氧芐胺嘧啶藥物殘留的方法,該法檢測(cè)限0.025mg/kg,回收率為84%~98%。此外,在人血中藥物含量的測(cè)定中也有很多的應(yīng)用。建立了血漿及尿液中異煙jing的液相色譜快速測(cè)定方法,以滿(mǎn)足臨床藥物分析和法醫(yī)學(xué)鑒定的需要,提高對(duì)血漿及尿液中異煙jing濃度檢測(cè)的準(zhǔn)確性。以香草醛為衍生化試劑,將異煙jing經(jīng)柱前衍生為異煙jing香草醛腙,直接對(duì)處理后樣品中的腙進(jìn)行定性、定量分析。以在空白人體液樣本中定量添加標(biāo)準(zhǔn)異煙jing的方法考察了樣品的前處理方法、儀器條件、線(xiàn)性范圍、精密度、回收率等,并對(duì)健康受試者血液中的異煙jing濃度進(jìn)行了監(jiān)測(cè)。

 

液相色譜法由于分析速度快、分離效率高、檢測(cè)靈敏度高、檢測(cè)自動(dòng)化、適用范圍廣、組分易回收、樣品處理較簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)在確定藥方案和治療劑量,以及藥物動(dòng)力學(xué)分析和藥效學(xué)評(píng)價(jià)提供了方法的基礎(chǔ),有著廣泛的應(yīng)用前景。

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